ПГТ

ПГТ - современный вектор вспомогательных репродуктивных технологий. Один цикл ЭКО - один здоровый ребенок

Несмотря на неуклонное развитие вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), 60% пациенток клиник репродукции по-прежнему не достигают клинической беременности в одном цикле и около 20% - после трех циклов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). [1,2]

Ключевым этапом каждого цикла ЭКО является скрининг подготовленных для переноса в полость матки эмбрионов в целях отбора эмбрионов с наивысшим имплантационным потенциалом, лишенных хромосомной и генной патологии. Сделать это безошибочно, опираясь только на морфологические маркеры, удается не всегда. Нормальные морфокинетические характеристики эмбриона не могут исключить наличие хромосомных аномалий, являющихся одной из самых частых причин неудачных протоколов ВРТ.

Корреляции между морфологическим и генетическим статусом эмбриона не существует. Около 44,5% морфологически нормальных бластоцист являются анеуплоидными [2]. Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ/ PGT) призвано исправить такую ситуацию. В его современном технологическом состоянии – это высокоэффективный инструмент, повышающий результативность протоколов ВРТ в целом и существенно снижающий риски хромосомной и генной патологии у потомства. [3]

Всё чаще и абсолютно обосновано выбором пациентов становятся клиники репродукции, где возможность ПГТ имеется, а хорошей эмбриологической лабораторией принято считать ту, которая проводит данный вид исследования.

Клинический эффект ПГТ:

• Вероятность наступления беременности с первого цикла ЭКО повышается (в среднем у каждой 4-ой - 5-ой пациентки)
• Частота наступления клинической беременности (ЧНКБ/CPR) увеличивается до 69-71% по сравнению со стандартным ЭКО без ПГТ, где частота наступления беременности на цикл не превышает 40%
• Показатель пролонгирующихся после ВРТ беременностей (OPR) составляет в среднем до 70-80% (в том числе в связи с переносом одного эуплоидного эмбриона)
• Частота беременностей, закончившихся родами (DR), может достигать 90%
• Рождение здорового ребенка (THBR). Несмотря на то, что ПГТ за пределами разрешающей способности конкретного метода исследования не может полностью исключить все известные генетические патологии, шанс рождения здорового ребенка значительно увеличивается

Виды ПГТ:

• ПГТ-А – преимплантационное генетическое тестирование на хромосомный дисбаланс
• ПГТ-М – преимплантационное генетическое тестирование на моногенное заболевание

Методы ПГТ

ПГТ-А методом NGS (Next Generation Sequencing) – это секвенирование нового поколения. Валидационные исследования этого метода для хромосомного скрининга эмбрионов указывают на сравнимую точность и эффективность у эуплоидных эмбрионов в интервале 99,20% - 100% для каждой хромосомы [5,6,7]. NGS предоставило возможность проведения полногеномного анализа и комплексной оценки широкого спектра хромосомных аномалий, таких как анеуплоидии, сегментарные дефекты, некоторые типы полиплоидий.

ПГТ-А методом aCGH (хромосомный микроматричный анализ, сравнительная геномная гибридизация на чипах) – это полнохромосомный микроматричный молекулярно-цитогенетический скрининг подготовленных к переносу эмбрионов на хромосомный дисбаланс. В данном методе используются различные платформы (микрочипы) с разной степенью разрешающей способности под определенную клиническую задачу (детекция анеуплоидий, детекция анеуплоидий и структурных хромосомных перестроек, таких как делеции, дупликации, а также несбалансированные транслокации).

ПГТ-А методом SNP (анализ однонуклеотидных полиморфизмов (SNPs, Single nucleotide polymorphism) на микроматричной платформе. Главное преимущество ПГТ-А методом SNP заключается в том, что с его помощью можно выявить хромосомные аномалии, не определяемые NGS и aCGH, в частности происхождение хромосомного дисбаланса (отцовское или материнское).

Новая неинвазивная технология ПГТ-А – niPGT. Эта технология исключает биопсию клеток эмбриона (не инвазивен), что обеспечивает простоту взятия материала. Исследование проводится на ДНК, выделенной из отработанной среды для культивирования эмбрионов. При этом имплантационный потенциал эмбриона не страдает.

ПГТ-М - преимплантационный генетический анализ доимплантационных эмбрионов в целях профилактики моногенной патологии у будущего ребенка. Предназначен для пар с высоким риском наследования потомством моногенного заболевания.

На каком биоптате мы работаем? Мы работаем с клетками трофэктодермы –наружной оболочки бластоцистов, которая обеспечивает успешную имплантацию зародыша и дает начало развитию плаценты. Биологический материал у эмбриона отбирается на стадии бластоцисты. Биопсия проводится на 5-6 сутки развития эмбриона. Такая методика безопасна для эмбриона и оптимальна для самого исследования с точки зрения качества продуктов амплификации и выявления мозаицизма.

Публикации

1. Liu L., Zhou F., Lin X., Li T., Tong X., Zhu H., Zhang S. Recurrent IVF failure with elevated progesterone on the day of hCG administration. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2013; 171(1): 78-83.
2. Minasi M.G., Fiorentino F., Ruberti A. et al. Genetic diseases and aneuploidies can be detected with a single blastocyst biopsy: a successful clinical approach. Hum. Reprod. 2017; 32(8): 1770–7. DOI: 10.1093/humrep/dex215.
3. Ле Тхи Бич Фуонг и др. Выбор эуплоидных эмбрионов для переноса с помощью предимплантационного генетического тестирования на анеуплоидию улучшил клинические исходы у пациенток с пожилым возрастом матери. Тестирование пациентов старшего материнского возраста, 2019 г.
4. Смирнова А.А., Зыряева Н.А., Аншина М.Б. Возрастные изменения и риск хромосомных аномалий в ооцитах человека (обзор литературы). Проблемы репродукции. 2019;25(2):16-26.
5. Кунг А. и др., Валидация секвенирования следующего поколения для комплексного хромосомного скрининга эмбрионов. Репродуктивная биомедицина , 2015; 1472-6483.
6. Fiorentino F, Biricik A, Bono S, Spizzichino L, Cotroneo E, Cottone G., Kokocinski F, Michel CE. Development and validation of a next-generation sequencing-based protocol for 24-chromosome aneuploidy screening of embryos. Fertil. Steril., 2014, 101(5): 1375-1382
7. Tan Y, Yin X, Zhang S et all. Clinical outcome of preimplantation genetic diagnosis and screening using next generation sequencing. GigaScience, 2014, 3(1): 30.